實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心宋國(guó)華課題組在International Journal of Biochemistry and Cell Biology發(fā)文揭示miR-504在口腔鱗狀細(xì)胞癌癌變中的作用機(jī)制
2020年2月，山西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心宋國(guó)華實(shí)驗(yàn)室在“International Journal of Biochemistry and Cell Biology”期刊正式發(fā)表了題為“MicroRNA-504 functions as a tumor suppressor in oral squamous cell carcinoma through inhibiting cell proliferation, migration and invasion by targeting CDK6”的研究成果。
口腔鱗狀細(xì)胞癌（oral squamous cell carcinoma,，OSCC）是最常見(jiàn)的口腔癌,，其發(fā)病率占全部口腔癌患者的90%以上,。目前針對(duì)OSCC的預(yù)防和早期檢測(cè)措施尚未完善,，患者就診時(shí)大多處于癌癥中晚期階段,。由于腫瘤的轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā),，晚期OSCC患者的手術(shù)及放化療效果不佳,。因此,，深入闡明OSCC的發(fā)病機(jī)制，尋找新型療法,，有望提高患者的生存率,。大量研究顯示microRNA（miRNA）可作為癌基因或抑癌基因參與調(diào)控腫瘤的發(fā)生發(fā)展。但目前針對(duì)miRNA在人類OSCC中的作用機(jī)制了解甚少,。課題組前期研究過(guò)程中已成功建立中國(guó)地鼠口腔鱗狀細(xì)胞癌動(dòng)物模型,，并構(gòu)建了miRNA差異表達(dá)譜，篩選出異常表達(dá)的miR-504,。本研究的目的是探究miR-504對(duì)OSCC細(xì)胞生物學(xué)行為的影響,，明確其在OSCC病變中的作用機(jī)制，以期為miR-504的臨床應(yīng)用提供更多的理論依據(jù),。
本研究揭示了miR-504在口腔鱗狀細(xì)胞癌中發(fā)揮抑癌作用,，其通過(guò)靶向CDK6抑制OSCC細(xì)胞增殖、生長(zhǎng),、遷移和侵襲,。miR-504的表達(dá)水平可能在OSCC的癌前診斷和預(yù)后預(yù)測(cè)中發(fā)揮重要作用。然而,，miR-504與周期相關(guān)基因和自噬相關(guān)基因之間微妙而復(fù)雜的調(diào)控機(jī)制仍需大量研究加以驗(yàn)證,。
該研究的主要結(jié)果有：
1 OSCC動(dòng)物樣本的病理特征及miR-504表達(dá)檢測(cè)
根據(jù)中國(guó)地鼠口腔鱗狀細(xì)胞癌動(dòng)物模型組織樣本的病理學(xué)特征將腫瘤的癌變分為四個(gè)階段：藥物誘導(dǎo)不同時(shí)間后中國(guó)地鼠的頰囊組織由正常上皮逐漸變?yōu)閱渭冊(cè)錾纳掀そM織，再到異常增生的上皮組織,，并最終演變?yōu)榭谇击[狀細(xì)胞癌（原位癌）,。在不同病變階段的動(dòng)物組織樣本中miR-504的表達(dá)隨著腫瘤的不斷惡化逐漸降低（圖1）。
2 miR-504表達(dá)對(duì)OSCC細(xì)胞生物學(xué)行為的影響
在人類OSCC細(xì)胞系Cal27與Tca8113中,，通過(guò)脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染技術(shù)過(guò)表達(dá)OSCC細(xì)胞中的miR-504,。結(jié)果顯示miR-504過(guò)表達(dá)能夠顯著抑制OSCC細(xì)胞的增殖、生長(zhǎng),、遷移和侵襲,，但對(duì)OSCC細(xì)胞凋亡無(wú)明顯影響（圖2、圖3,、圖4）,。
3 miR-504靶基因驗(yàn)證及其在OSCC細(xì)胞中的機(jī)制研究
生物信息學(xué)軟件預(yù)測(cè)CDK6為OSCC中miR-504的潛在靶標(biāo)。雙熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)證實(shí)CDK6為miR-504的直接靶標(biāo),，且miR-504與CDK6的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。miR-504過(guò)表達(dá)可顯著抑制OSCC細(xì)胞中細(xì)胞周期相關(guān)蛋白E2F1與CyclinD1表達(dá)，促進(jìn)p21蛋白表達(dá),。同時(shí),，miR-504過(guò)表達(dá)還可抑制OSCC細(xì)胞中細(xì)胞自噬標(biāo)志基因Beclin1蛋白表達(dá)（圖5）。
基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院2018級(jí)碩士研究生王曉堂,、2016級(jí)碩士研究生常凱與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心高繼萍老師為論文的共同第一作者,，宋國(guó)華教授為通信作者。本研究在國(guó)家自然科學(xué)基金（31970513和31772551）資助下完成,。
原文鏈接：https://www.sciencedirect.com/science/article/pi
i/S1357272519302407?via%3Dihub
